客西馬尼園(希伯來語:גת שמנים意為“榨油機”),是耶路撒冷的一個果園,位於橄欖山下的汲淪谷,今天位於耶路撒冷市內。據說是耶穌基督經常禱告與默想之處,所以猶大可以在那裡找到他們。相傳園中的八棵巨大的橄欖樹在耶穌時期即存在。
根據《新約聖經》和基督教傳統,耶穌被釘死在十字架上的前夜,和他的門徒在最後的晚餐之後前往此處禱告。根據《路加福音》第22章第43–44節的記載,耶穌在客西馬尼園極其憂傷,“汗珠如大血點滴落在地上”。客西馬尼園也是耶穌被他的門徒加略人猶大出賣的地方。客西馬尼園是早期基督徒朝聖的焦點。 333年,匿名的“波爾多朝聖者”前來拜訪,留下基督徒前往聖地朝聖的最早記載。
这裡很早就建有教堂但多次被毁,现在所见的教堂于西元1919年在原址重新修建, 但因所需金费不足,曾经一度停建,后共有14个国家相继伸出援手(美国、德国、加拿大、英国、法国、意大利、比利时、西班牙、巴西、墨西哥、智利、阿根廷、波兰、澳大利亚)才陆续完成教堂的修建工程,因此又称为万国教堂 (Church of All Nations);天主教方济会从十七世纪就已在此保护并管理客西马尼园直到今日。万国教堂 (Church of All Nations) 是每一位来到耶路撒冷的基督徒必定要去的地方,记念耶稣被卖的那一夜,彻夜祷告的地方。